平台概况

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来源 : 作者 : admin 时间 : 2011-12-01

转基因/基因敲除小鼠模型，在生物医学及新药研发等领域具有非常重要的价值，是生命科学研究不可或缺的工具，它可以从遗传角度预测人类疾病，阐明发病机理，研究治疗方法，开发新的治疗药物，对疾病的预防、控制和治疗的研究起重要作用。

杭州师范大学小鼠转基因/基因打靶平台，由从美国引进的具有多年管理同类平台经验的高端人才领衔，聚集了一批学术造诣深厚、技术全面的海外留学人员和来自国内知名科研院所的专业技术人才。

自2011年7月运行以来，截至2013年10月，本平台已成功制备30余个基因敲除小鼠品系模型。本平台现具备载体构建、产物鉴定、细胞培养、细胞打靶、显微注射、胚胎移植、品系繁育、咨询服务等一整套技术体系，竭诚为各科研院所提供优质、高效、稳定的模式动物制备服务。

中心岗位主要人员及责任：

中心目前有专职干细胞培养及基因打靶的技术员1名；有从事小鼠繁育养殖，动物手术及显微注射操作的硕士技术员1名；从事载体构建等分子生物学操作的助理研究员1名。

主任	张遵义（博士、教授）	中心的学术及技术总负责人
载体构建设计、产物鉴定	李建营（博士、助理研究员）	负责载体构建设计、产物鉴定
干细胞培养及基因打靶	李艳（硕士、技术员）	负责载体纯化，干细胞培养，基因打靶及细胞冷冻保种
动物操作及显微注射	羊雪芹（硕士、技术员）	负责各种专用小鼠品系的繁育养殖，DNA原核注射，小鼠干细胞胚泡注射

科研服务内容：

DNA原核显微注射

服务描述：

将研究者提供的目的DNA注射到250个受精卵，显微注射后移植至代孕母鼠输卵管中。小鼠出生后2-3w，提供不少于2只基因型鉴定为阳性的F₀代转基因小鼠，但是我们不保证其生殖遗传性。

我们用于原核注射的品系背景小鼠为B₆D₂F₁(C57BL/6×DBA/2)。

需提供的材料：

名称	要求
质粒	提供如下信息： 1. 标注名称、浓度，质粒浓度≥500ng/ul，质量≥50ug。 2. 得到目的条带（需要注射的条带）酶切所用酶、酶切条件、目的条带大小，并且需要有酶切电泳图谱示范。
注射用DNA	高纯度、无污染的，经过线性化、纯化处理（GENECLEAN^®Turbo Kit，MPbio），浓度大于100ng/µl，体积大于100µl。

服务周期及费用：

胚胎干细胞显微注射

服务描述：

通过打靶载体的设计与构建、电转化和干细胞注射，生产出嵌合体小鼠，并且我们承诺提供不少于3只雄性嵌合体小鼠。如果客户自行提供干细胞，我们不保证能生产出嵌合体小鼠。

本平台用于打靶用干细胞品系：	W4(129S6) (http://www.atcc.org/)
注射用囊胚品系：	C57BL/6×C57BL/6

需提供的材料：

名称	要求
ES细胞	1. 质粒名称，并标注浓度和质量，质量≥300ug，浓度≥1000ng/ul。 2. 质粒线性化酶切所用酶、酶切条件、目的条带大小，并且需要有酶切电泳图谱示范。 3. 129品系以外的ES cell，相关服务及价格再协商。 4. 如有特殊注射要求请告知。
基因信息	基因名称，构建要求等。备注：干细胞打靶，由研究者来鉴定筛选阳性ES cell株。

服务周期及费用：

J特别提示：

由于实验试剂耗材随市场价格波动，我们保留价格调整的权利。

联系我们：

地址：浙江省杭州市下沙高教园学林街16号，杭州师范大学发育与再生研究所

联系人：张老师

邮箱：zunyi.zhang@yahoo.com，yangxqzju@163.com

电话：0571-28867677，0571-28865657